平表达情况。
结果表明正常培养的人腹膜间皮细胞（hpmcs）未能检测到has-1mrna表达，仅能检测到has-2mrna和has-3mrna表达，has-2mrna表达水平是has-3mrna表达水平的9.8倍（p〈0.05〉。
继而根据上述实验结果设计特异针对has-2(has-2ecific)的反义（antisee）寡核苷酸序列，并同时设计see[2]序列和reverse序列作为对照，使其与lipofectamine形成dna-脂质体混合物，分别将其转入正常培养的hpmcs中。转染后0、8、24、48小时提取细胞总rna，以rt-pcr法观察has-2mrna表达的变化，并以微粒排除法观察细胞衣样结构面积的变化。
结果表明：转染8小时后has-2mrna表达下降58（p<0.05），转染24小时后has-2mrna表达量明显下降89（p<0.01），转染后48小时has-2mrna表达已部分恢复至正常表达水平的25（p〈0.05〉。相应地，转染后24小时以微粒排除法观察hpmcs细胞胞衣样结构面积与细胞体面积的比值，亦明显减少至几乎完全消失。作为对照的see和reverse序列则没有这一作用。
这一结果证实has-2是正常培养人腹膜间皮细胞(hpmcs)合成透明质酸以及细胞胞衣样结构形成的要害酶，并提示正常生理状态下hpmcs以合成大分子量的透明质酸为主。
四．炎症介质、渗透压制剂、不同分子量透明质酸对人腹膜间皮细胞透明质酸合成酶的调节作用
1．炎症介质对人腹膜间皮细胞透明质酸合成酶的调节作用
为了解炎症因子对人腹膜间皮细胞(hpmcs)透明质酸合成酶的调节作用及对透明质酸（ha）合成的影响，分离培养的第2代人腹膜间皮细胞(hpmcs)消化传代至六孔培养板,培养48小时后随机分为4组,分别为:正常对照组(对照组)、脂多糖组(l，10ng/ml)、肿瘤坏死因子-α(tnf-α，100u/ml)组,白介素-1β(il-1β，100u/ml)组,继续培养24小时。hpmcs的has-2及has-3mrna表达以逆转录多聚酶链反应（rt-pcr）法检测；细胞衣样结构合成以微粒排除法检测；细胞培养上清液透明质酸（ha）的浓度以放射免疫分析法检测。结果如下：
l、tnf-α组has-2mrna的表达较对照组明显增加（p值均〈0.05〉，il-1β组has-2mrna表达虽较对照组增强，但未达统计学差异（p＝0.334）。l、il-1β、tnf-α组has-3mrna表达均较对照组明显增加（p值均〈0.05〉；l、tnf-α、il-1β组对has-3mrna表达增强作用分别是其对has-2mrna作用的1.2倍、4.4倍、15.2倍；3组炎症因子中对has-3作用最强的是il-1β，其使hpmchas-3mrna表达增强了21倍。对照组、l、il-1β、tnf-α组细胞胞衣样结构面积与细胞体面积的比值各组间没有显著差异（p>

0.05）;对照组、l、il-1β、tnf-α组细胞培养上清液透明质酸（ha）的浓度均显著高于对照组(p值均<0.05)。
这提示炎症因子可上调hpmcs透明质酸合成酶has-2mrna、has-3mrna的表达和促进透明质酸的合成。由于其对hpmcs透明质酸合成酶的调节主要表现为对has-3mrna的增强作用，提示炎症状态主要促进hpmcs合成小分子量透明质酸。
2．渗透压制剂对人腹膜间皮细胞(hpmcs)透明质酸合成的影响
为了解不同渗透压制剂

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